Untuk penggunaan diagnostik in vitro dan profesional saja.
Nama
Kit Uji ELISA Anti-Ct IgG (Serum/Plasma)
PENGGUNAAN YANG DIMAKSUD
Kit ini adalah deteksi kualitatif serum/plasma manusia terhadap Chlamydia trachomatis (Ct) IgG. Kit ini
cocok untuk skrining klinis dan diagnosis infeksi Ct pada serum/plasma.
PRINSIP UJI
Antigen Ct diserap dalam fase padat ke dalam microplate reaksi polistirena. Jika ada antibodi Ct IgG
dalam sampel uji, ia akan berikatan dengan antigen Ct yang dilapisi pada microplate, membentuk kompleks antigen-antibodi, dan kemudian
berikatan dengan antibodi anti-enzim berlabel dan membentuk kompleks antigen-antibodi-antibodi pada permukaan
microplate, dan menampilkan warna biru di sumur yang sesuai melalui aksi substrat. Oleh karena itu, ia
dapat mendeteksi secara spesifik IgG Ct dalam serum/plasma manusia.
PROSEDUR UJI
1. Samakan semua reagen dengan suhu ruangan selama 15 menit sebelum digunakan.
2. Encerkan buffer pencuci dengan perbandingan 1:40 dengan air suling sebelum digunakan.
3. Tambahkan 100μL Pengencer Sampel ke dalam sumur yang sesuai (Jangan tambahkan ke sumur kosong, kontrol negatif
dan sumur kontrol positif.) Sampel harus sesuai dengan jumlah micro
plate, setiap plate harus dilengkapi dengan 2 sumur kontrol negatif, 1 sumur kontrol positif, dan 1 sumur
kontrol kosong. Tambahkan 5μL sampel ke dalam sumur yang sesuai, campur hingga merata menggunakan pipet, tambahkan
50μL kontrol negatif dan kontrol positif ke sumur kontrol negatif dan sumur kontrol positif (Jangan
tambahkan ke sumur kosong).
Catatan: Gunakan ujung pipet sekali pakai yang terpisah untuk setiap spesimen, Kontrol Negatif dan Positif untuk
menghindari kontaminasi silang.
4. Kocok perlahan untuk mencampur selama 30 detik. Inkubasi pada suhu 37°C selama 20 menit dengan membran penutup plate
menutup plate.
5. Di akhir inkubasi, lepaskan dan buang penutup plate. Ambil, tambahkan buffer pencuci ke
setiap sumur selama 20 detik. Ulangi 5 kali. Setelah siklus pencucian terakhir, balikkan plate ke atas
kertas penyerap atau handuk bersih, dan tepuk untuk menghilangkan sisa-sisa.
6. Masing-masing tambahkan 50µL Konjugat Enzim (Jangan tambahkan ke sumur kosong)
7. Inkubasi pada suhu 37°C selama 20 menit dengan membran penutup plate menutup plate. Ulangi langkah pencucian
sebanyak 5 kali seperti pada langkah 5.
8. Tambahkan 50µL Substrat A dan 50µL Substrat B (Jangan tambahkan ke sumur kosong). Inkubasi pada suhu 37°C selama
10 menit dengan membran penutup plate menutup plate.
9. Tambahkan 50μL Larutan Penghenti ke setiap sumur (Jangan tambahkan ke sumur kosong). Campur perlahan dengan mengocok, baca
absorbansi dalam waktu 10 menit setelah menghentikan reaksi. Kalibrasi pembaca plate dengan sumur Kosong
dan baca absorbansi pada 450nm. Jika digunakan instrumen filter ganda, atur panjang gelombang referensi
pada 630nm. Jangan gunakan sumur kosong jika menggunakan panjang gelombang ganda untuk mendeteksi. Hitung
nilai Cut-off dan evaluasi hasilnya.
INTERPRETASI HASIL
Kronometri: Baca densitas optik (OD) sampel pada 450nm dengan pembaca micro plate.
Nilai OD kontrol negatif rata-rata ≤ 0,1 dan nilai OD kontrol positif rata-rata ≥ 0,8, uji valid,
jika tidak, uji tidak valid.
Nilai Cut-Off (C.O.) = Nilai OD rata-rata kontrol negatif x 3 (Dihitung sebesar 0,10 jika nilai OD kontrol negatif rata-rata
adalah < 0,10, dihitung berdasarkan nilai aktual jika nilai OD kontrol negatif rata-rataadalah > 0,10)
Hasil Positif: Nilai OD sampel ≥ C.O.
Pesan Anda harus antara 20-3.000 karakter!
Indonesian
