Elisa LH Test Strip Kit Uji Hormon Luteinizing ISO13485 96 Pcs

LH Elisa Kit Luteinizing Hormone

1. Tujuan penggunaan

Immunoassay untuk penentuan kuantitatif in vitro hormon luteinizing dalam serum manusia.

2. Ringkasan

• LH (hormon luteinizing), bersama dengan FSH (hormon perangsang folikel), termasuk dalam keluarga gonadotropin.LH dan FSH mengatur dan merangsang pertumbuhan dan fungsi gonad (ovarium dan testis) secara sinergis.Seperti FSH, TSH dan hCG, LH adalah glikoprotein yang terdiri dari dua subunit (rantai dan ).(1, 2, 3) Proteohormon ini, yang terdiri dari 121 asam amino dan tiga rantai gula, memiliki berat molekul 29.500 dalton.Pada wanita, gonadotropin bekerja dalam sirkuit pengatur hipotalamus-hipofisis-ovarium untuk mengontrol siklus menstruasi.
• LH dan FSH dilepaskan dalam bentuk pulsa dari sel gonadotropik hipofisis anterior dan melewati aliran darah ke ovarium.Di sini gonadotropin merangsang pertumbuhan dan pematangan folikel dan karenanya biosintesis estrogen dan progesteron.Konsentrasi LH tertinggi terjadi selama puncak pertengahan siklus dan menginduksi ovulasi dan pembentukan korpus luteum, produk sekresi utamanya adalah progesteron.Dalam sel Leydig testis, LH merangsang produksi testosteron.Penentuan konsentrasi LH digunakan dalam penjelasan disfungsi dalam sistem hipotalamus-hipofisis-gonad.Penentuan LH bersama dengan FSH digunakan untuk indikasi berikut: penyakit bawaan dengan kelainan kromosom (misalnya sindrom Turner), ovarium polikistik (PCO), mengklarifikasi penyebab amenore, sindrom menopause, dan dugaan insufisiensi sel Leydig.(1, 4, 5)

3. Prinsip pengujian

Prinsip sandwich.Total durasi pengujian: 80 menit.

• Sampel, microwell berlapis Anti-LH dan enzim berlabel Anti-LH digabungkan.

• Selama inkubasi, LH yang ada dalam sampel dibiarkan bereaksi

bersamaan dengan dua antibodi, sehingga molekul LH menjadi

terjepit di antara fase padat dan antibodi terkait-enzim.

• Setelah pencucian, kompleks dihasilkan antara fase padat, LH dalam sampel dan antibodi terkait-enzim melalui reaksi imunologis.

• Larutan substrat kemudian ditambahkan dan dikatalisis oleh kompleks ini, menghasilkan reaksi kromogenik.Reaksi kromogenik yang dihasilkan diukur sebagai absorbansi.

• Absorbansi sebanding dengan jumlah LH dalam sampel.

Reagen

Materi yang disediakan

• Pelat Mikro Dilapisi, 8 x 12 strip, 96 lubang, pra-dilapisi dengan monoklonal mouse

Anti LH.

• Kalibrator, 6 vial, masing-masing 1 ml, siap pakai;Konsentrasi: 0(A), 5(B), 20(C), 50(D), 100(E) dan 200(F) mIU/mL.

• Enzyme Conjugate, 1 vial, 11 mL HRP (horseradish peroxidase) berlabel tikus monoklonal Anti-LH dalam buffer Tris-NaCl yang mengandung BSA (bovine serum albumin).Mengandung 0,1% ProClin300 pengawet.

• Substrat, 1 vial, 11ml, siap pakai, (tetramethylbenzidine) TMB.

• Stop Solution, 1 vial, 6,0 ml 1 mol/L asam sulfat.

• Konsentrat Larutan Pencuci, 1 vial, 25 mL (konsentrat 40X), PBS-Tween

larutan cuci.

• IFU, 1 salinan.

• Tutup Piring : 1 buah.

Bahan yang dibutuhkan (tetapi tidak disediakan)

• Pembaca pelat mikro dengan kemampuan penyerap panjang gelombang 450nm dan 620nm.

• Mesin cuci piring mikro.

• Inkubator

4. Prosedur pengujian

• Gunakan hanya jumlah sumur yang diperlukan dan format sumur pelat mikro untuk

setiap kalibrator dan sampel yang akan diuji.

• Tambahkan 25 L kalibrator atau sampel ke setiap sumur.

• Tambahkan 100 L enzim konjugat ke masing-masing sumur.

• Kocok pelat mikro perlahan selama 30 detik agar tercampur.

• Tutup piring dengan penutup piring dan inkubasi pada suhu 37 °C selama 60 menit.

• Buang isi piring mikro dengan dekantasi atau aspirasi.Jika

tuang, ketuk dan keringkan pelat dengan kertas penyerap.

• Tambahkan 350 L larutan pencuci, tuang (ketuk dan blot) atau aspirasi.Ulangi 4 kali tambahan untuk total 5 kali pencucian.Mesin cuci strip microplate otomatis dapat digunakan.Di akhir pencucian, balikkan piring dan tepuk sisa larutan pencuci ke kertas penyerap.

• Tambahkan 100 L substrat ke setiap sumur.

• Inkubasi pada suhu lingkungan (18-25℃) dalam gelap untuk reaksi selama 20 menit.Jangan goyangkan pelat setelah penambahan substrat.

• Tambahkan 50 l stop solution ke setiap sumur.

• Kocok selama 15-20 detik untuk mencampur cairan di dalam sumur.Ini penting untuk

memastikan bahwa warna biru berubah menjadi kuning sepenuhnya.

• Baca absorbansi masing-masing sumur pada 450 nm (menggunakan 620 hingga 630 nm sebagai

panjang gelombang referensi untuk meminimalkan ketidaksempurnaan sumur) dalam pembaca pelat mikro.