1. Hitung jumlah mikrowell yang diinginkan. Keluarkan mikrowell yang tersisa dan masukkan ke dalam desikan ke dalam
kantong plastik yang dapat ditutup kembali, segel dan simpan pada suhu 2-8°C untuk digunakan nanti.
2. Tambahkan Kalibrator dan Sampel:
2. 1 Sumur kosong: Jangan tambahkan reagen.
2. 2 Sumur Kalibrator: Tambahkan 100 µL Kalibrator ke dalam sumur kontrol yang ditentukan.
2.3 Sumur Tes: Tambahkan 100 uL Pengencer Sampel ke sumur tes, lalu tambahkan 10 uL sampel ke dalam sumur yang sesuai.
2.4 Kocok pelat dengan lembut selama 20 detik, lalu tutup pelat dengan penutupnya.
3. Inkubasi: Inkubasi pelat pada suhu 37°C selama 30 menit.
4. Langkah Pencucian (Dapat dilakukan secara manual atau dengan pencucian otomatis):
Pencucian manual: Buang campuran inkubasi dengan hati-hati dengan membuang larutan ke dalam wadah limbah. Isi setiap
sumur dengan 350 µL buffer pencuci yang diencerkan dan kocok perlahan selama 20-30 detik. Buang larutan pencuci sepenuhnya. Ulangi 4
kali lagi. Setelah menyelesaikan langkah pencucian terakhir, ketuk pelat pada kertas penyerap untuk menghilangkan sisa cairan.
Pencucian otomatis: Pencuci pelat otomatis harus dikalibrasi untuk memastikan pencucian yang efisien. Isi setiap sumur dengan 350 µL
buffer pencuci yang diencerkan dan rendam selama 20-30 detik. Aspirasi semua sumur sepenuhnya. Ulangi 4 kali lagi.
5. Konjugat: Tambahkan 100 μL konjugat ke setiap sumur kecuali Sumur Kosong.
6. Inkubasi: Tutup sumur dan inkubasi pada suhu 37°C selama 30 menit.
7. Langkah Pencucian: Cuci pelat 5 kali seperti yang dijelaskan pada langkah 4.
8. Substrat: Tambahkan 50 µL Substrat A dan 50 µL Substrat B ke setiap sumur, termasuk Sumur Kosong. Kocok perlahan
mikrowell selama 20 detik. Inkubasi pada suhu 37°C dalam gelap selama 15 menit.
9. Larutan Penghenti: Tambahkan 50 µL Larutan Penghenti ke setiap sumur. Warna kuning harus berkembang di sumur yang mengandung spesimen Positif.
10. Baca Hasil: Baca pada 450/630-700 nm dalam waktu 30 menit.
1. Catatan: Microplate juga dapat dibaca pada 450 nm, tetapi sangat disarankan untuk membacanya pada 450/630-700 nm untuk
hasil yang lebih baik.
Kronometri: Baca kerapatan optik (OD) sampel pada 450nm dengan pembaca pelat mikro.
Nilai OD kontrol negatif Rata-rata ≤ 0,1 dan nilai OD kontrol positif Rata-rata ≥ 0,8, tes valid,
jika tidak tes tidak valid.
Nilai Batas Potong (C.O.) = Nilai OD Rata-rata kontrol negatif x 3 (Dihitung dengan 0,10 ketika Rata-rata
nilai OD kontrol negatif adalah < 0,10, dihitung dengan nilai aktual ketika Rata-rata kontrol negatif OD
Hasil Positif: Nilai OD Sampel ≥ C.O.
Pesan Anda harus antara 20-3.000 karakter!
Indonesian
