2. encerkan penyangga cuci dengan kecepatan 1: 40 dengan air suling sebelum digunakan.
3. Tambahkan 100μL sampel pengencer dalam sumur yang sesuai (Jangan menambahkan dalam sumur kosong, negatif
sampel harus sesuai dengan jumlah mikro
plat, setiap plat harus dilengkapi dengan kontrol negatif 2 sumur, kontrol positif 1 sumur dan kosong
tambahkan sampel 5μL ke dalam sumur yang sesuai, aduk dengan baik dengan menggunakan pipet, tambahkan
50μL kontrol negatif dan kontrol positif ke sumur kontrol negatif dan sumur kontrol positif (Jangan
tambahkan dalam sumur kosong).
Catatan: Gunakan ujung pipet pembuangan yang terpisah untuk setiap sampel, kontrol negatif dan positif untuk
Hindari kontaminasi silang.
4. goyangkan dengan lembut untuk mencampur selama 30 menit. incubate pada 37 °C selama 20 menit dengan membran pelat penyegelan
Menutup plat.
5Pada akhir inkubasi, lepaskan dan buang penutup piring.
Setelah siklus pencucian terakhir, putar piring ke
kertas penghapus atau handuk bersih, dan ketuk untuk menghilangkan sisa-sisa.
6. masing-masing menambahkan Enzyme Conjugate 50μL (Jangan tambahkan dalam sumur kosong)
7. Inkubasi pada 37°C selama 20 menit dengan membran pelat penyegelan menyegel pelat.
langkah mencuci selama 5 kali seperti pada langkah 5.
8Tambahkan Substrat A 50μL dan Substrat B 50μL (Jangan tambahkan dalam sumur kosong).
10 menit dengan membran pelat penyegelan menyegel pelat.
9Tambahkan 50μL Stop Solution ke setiap sumur (Jangan tambahkan ke dalam sumur kosong).
Kalibrasi pembaca plat dengan Blank
dengan baik dan membaca penyerapan pada 450nm. Jika instrumen filter ganda digunakan, atur referensi
Set tidak ada lubang kosong yang diizinkan jika menggunakan panjang gelombang ganda untuk mendeteksi.
Nilai cut-off dan mengevaluasi hasilnya.
Chronometry: Membaca kepadatan optik sampel (OD) pada 450nm dengan micro plate reader.
Nilai OD kontrol negatif rata-rata ≤ 0,1 dan nilai OD kontrol positif rata-rata ≥ 0.8, tes tersebut sah,
Jika tidak, tes tidak valid.
Nilai cut-off (CO) = Nilai OD rata-rata kontrol negatif x 3 (Dihitung dengan 0,10 ketika rata-rata
nilai OD kontrol negatif adalah < 0.10, dihitung dengan nilai aktual ketika kontrol negatif rata-rata OD
nilai > 0,10)
Hasil positif: Sampel OD nilai ≥ CO
Pesan Anda harus antara 20-3.000 karakter!
Indonesian
