Hanya untuk diagnostik in vitro dan penggunaan profesional.
Nama
Kit Tes ELISA IgG Anti-Ct (Serum/Plasma)
PENGGUNAAN YANG DIMAKSUDKAN
Kit ini merupakan deteksi kualitatif serum/plasma manusia IgG Chlamydia trachomatis (Ct). Perlengkapannya adalah
cocok untuk skrining klinis dan diagnosis infeksi Ct dalam serum/plasma.
PRINSIP UJI
Antigen Ct diserap dalam fase padat ke pelat mikro reaksi polistiren. Jika terdapat antibodi Ct IgG
dalam sampel uji, ia berikatan dengan antigen Ct yang dilapisi pelat mikro, membentuk kompleks antigen-antibodi, dan kemudian
berikatan dengan enzim berlabel anti-antibodi dan membentuk kompleks antigen-antibodi-antibodi di permukaan
pelat mikro, dan menampilkan warna biru pada sumur yang sesuai melalui aksi media. Oleh karena itu, itu
dapat mendeteksi secara spesifik Ct IgG dalam serum/plasma manusia.
PROSEDUR UJI
1. Setarakan semua reagen pada suhu kamar selama 15 menit sebelum digunakan.
2. Encerkan buffer pencuci dengan kecepatan pengenceran 1:40 dengan air suling sebelum digunakan.
3. Tambahkan 100μL Sample Diluent ke dalam sumur yang sesuai (Jangan menambahkan ke dalam sumur kosong, negatif
sumur kontrol dan sumur kontrol positif.) Sampel harus sesuai dengan jumlah mikro
piring, setiap piring harus dilengkapi dengan kontrol negatif 2 sumur, kontrol positif 1 sumur dan blanko
kontrol 1 dengan baik. Tambahkan 5μL sampel ke dalam sumur yang sesuai, aduk rata dengan menggunakan pipet, tambahkan
50μL kontrol negatif dan kontrol positif ke sumur kontrol negatif dan sumur kontrol positif (Jangan
tambahkan sumur kosong).
Catatan: Gunakan ujung pipet pembuangan terpisah untuk setiap spesimen, Kontrol Negatif dan Positif
menghindari kontaminasi silang.
4. Kocok perlahan hingga tercampur selama 30 detik. Inkubasi pada suhu 37°C selama 20 menit dengan membran pelat penyegel
menyegel piring.
5. Di akhir inkubasi, lepas dan buang penutup pelat. Keluarkan, tambahkan buffer pencuci
masing-masing sumur selama 20 detik. Ulangi 5 kali. Setelah siklus pencucian terakhir, balikkan piring
kertas isap atau handuk bersih, dan ketuk untuk menghilangkan sisa-sisanya.
6. Masing-masing menambahkan Enzyme Conjugate 50µL (Jangan menambahkan pada wadah kosong)
7. Inkubasi pada suhu 37°C selama 20 menit dengan membran pelat penyegel yang menyegel pelat. Ulangi
langkah cuci sebanyak 5 kali seperti pada langkah 5.
8. Tambahkan Substrat A 50µL dan Substrat B 50µL (Jangan menambahkan pada wadah kosong). Inkubasi pada suhu 37 ℃ selama
10 menit dengan membran pelat penyegel yang menyegel pelat.
9. Tambahkan 50μL Stop Solution ke masing-masing sumur (Jangan tambahkan ke dalam sumur kosong). Aduk perlahan dengan cara dikocok, baca
penyerapan dalam waktu 10 menit setelah menghentikan reaksi. Kalibrasi pembaca pelat dengan Blank
baik dan baca serapannya pada 450nm. Jika instrumen filter ganda digunakan, atur referensinya
panjang gelombang pada 630nm. Tidak ada sumur kosong yang diperbolehkan jika menggunakan panjang gelombang ganda untuk mendeteksi. Hitung
Nilai batas dan evaluasi hasilnya.
INTERPRETASI HASIL
Kronometri: Baca kerapatan optik (OD) sampel pada 450nm dengan pembaca pelat mikro.
Nilai Mean kontrol negatif OD ≤ 0,1 dan nilai Mean kontrol positif OD ≥ 0,8 maka uji valid,
jika tidak, tes tersebut tidak valid.
Nilai Cut-Off (CO) = Nilai Mean OD kontrol negatif x 3 (Dihitung 0,10 bila Mean
nilai OD kontrol negatif < 0,10, dihitung dengan nilai sebenarnya ketika Mean OD kontrol negatif
nilainya > 0,10)
Hasil Positif: Nilai OD sampel ≥ CO