TB-IGRA ELISA TEST KIT

1. Prinsip

TB-IGRA adalah in vitro tes diagnostik yang mendeteksi respons imun yang dimediasi sel terhadap Mycobacterium tuberculosis (MTB) infeksi dengan mengukur interferon-gamma (IFN-γ) yang dilepaskan oleh sel T yang peka setelah stimulasi dengan antigen spesifik MTB (misalnya, ESAT-6, CFP-10, dan TB7.7).

2. Fitur Utama

• Spesifisitas Tinggi:

  • Menggunakan antigen spesifik MTB (tidak ada pada BCG dan sebagian besar mikobakteria non-tuberkulosis), meminimalkan hasil positif palsu.

• Sensitivitas Tinggi:

  • Mendeteksi infeksi TB aktif dan TB laten (LTBI) dengan akurasi superior dibandingkan dengan uji kulit tuberkulin (TST).

• Hasil Kuantitatif/Kualitatif:

  • Output bervariasi berdasarkan platform (misalnya, jumlah bintik dalam uji ELISPOT atau konsentrasi IFN-γ dalam ELISA).

• Penyelesaian Cepat: Hasil biasanya tersedia dalam 24–48 jam.

3. Persyaratan Sampel

• Jenis Sampel: Darah lengkap perifer segar (heparinized).

• Volume: Biasanya 1–3 mL per uji (bervariasi berdasarkan produsen kit).

• Penyimpanan: Proses dalam 8–32 jam (tergantung pada spesifikasi kit).

4. Prosedur Uji

1. Stimulasi: Inkubasi darah dengan antigen MTB dan kontrol (kontrol negatif/mitogen).

2. Deteksi IFN-γ:

   • Berbasis ELISPOT (misalnya, T-SPOT.TB): Hitung sel T yang mensekresi IFN-γ sebagai bintik.

   • Berbasis ELISA (misalnya, QuantiFERON-TB Gold): Ukur konsentrasi IFN-γ melalui immunoassay.

3. Interpretasi:

   • Hasil dibandingkan dengan nilai cutoff (bervariasi berdasarkan uji).

   • Hasil yang tidak dapat ditentukan mungkin memerlukan pengujian ulang.

5. Metrik Kinerja

• Sensitivitas: >90% untuk TB aktif, ~80% untuk LTBI.

• Spesifisitas: >95% (tidak terpengaruh oleh vaksinasi BCG).

• Reaktivitas Silang: Minimal dengan mikobakteria non-tuberkulosis (NTM).

6. Indikasi

• Penyaringan untuk LTBI pada kelompok berisiko tinggi (misalnya, pasien HIV+, pasien imunosupresi, kontak dekat).

• Uji tambahan untuk diagnosis TB aktif (harus berkorelasi dengan gejala klinis dan uji lainnya).

7. Keunggulan Dibandingkan TST

• Tidak ada reaktivitas silang dengan BCG.

• Pengujian sekali kunjungan (tidak perlu kembali untuk membaca).

• Hasil berbasis laboratorium yang objektif.

8. Keterbatasan

• Tidak dapat membedakan TB aktif dari LTBI.

• Membutuhkan peralatan laboratorium khusus.

• Biaya lebih tinggi daripada TST.

• Potensi hasil negatif palsu pada pasien immunocompromised.

9. Kit yang Kompatibel (Contoh)

• T-SPOT.TB (Oxford Immunotec): Berbasis ELISPOT.

• QuantiFERON-TB Gold Plus (Qiagen): Berbasis ELISA.

10. Status Regulasi

• Disetujui oleh FDA/CE/WHO untuk penyaringan infeksi TB.

Diagnostik In Vitro

Hanya untuk Penggunaan

Kit ini berisi reagen yang cukup untuk pengujian maksimum 28 spesimen dalam satu kali uji. Komponen Stimulasi:

1. Kontrol Negatif (Tutup Abu-abu)

2. Antigen TB, liofilisasi (Tutup Ungu)

3. Pengencer Antigen TB (Tutup Ungu)

4. Kontrol Positif (Tutup Merah) 28tes 28tes 0.9mL 28tes

Komponen ELISA

1. Strip Mikroplate

2. Standar IFN-γ Manusia, liofilisasi (Tutup Biru)

3. Pengencer

4. Antibodi Berlabel Biotin (Tutup Kuning) 12x 8 sumur 2 x vial 1 x 40mL 1 x 6mL

5. Konsentrat Konjugat Enzim 100X (Botol Coklat) 1 x 130μL

6. Buffer Cuci Konsentrat 10X 1 x 40mL

7. Larutan Kromogen A

8. Larutan Kromogen B

9. Larutan Penghenti 1 x 6mL 1 x 6mL 1 x 6mL

PRINSIP UJI