Kit Tes ELISA antibodi (IgE)

Penggunaan yang dimaksudkan

  Kit ini adalah deteksi kuantitatif total antibodi IgE (IgE) dalam serum/plasma manusia in vitro.tes IgE total juga dapat direkomendasikan untuk pasien dengan dugaan penyakit parasit.

Prinsip Ujian

  Hipersensitivitas langsung (alergi tipe I) dimediasi oleh IgE spesifik.peningkatan IgE spesifik pada pasien disertai dengan peningkatan total titer IgEPada kasus ini, titer dapat naik hingga 1.000 kali. Secara umum, satuan internasional per mililiter (IU/mL) didefinisikan sebagai: 1 IU/mL sama dengan 2.4ng IgE. Pada pasien dengan dermatitis alergi herediter,Tingkat IgE bisa setinggi 50Hasil tes yang lebih tinggi dari normal juga harus memperhitungkan dampak dari penyakit autoimun yang dikonfirmasi.

Reagen tidak dianjurkan untuk pemeriksaan fisik orang sehat, tes hasil positif atau negatif hanya atas nama tes IgE antibodi yang sesuai hasil positif atau negatif,korelasi ketidakpastian dengan pasien sakit dan mungkin tidak sebagai satu-satunya indeks evaluasi pasien, harus dikombinasikan dengan presentasi klinis pasien dan tes laboratorium lainnya untuk analisis terintegrasi penyakit.

Metode deteksi kit ini adalah imunoassay yang terkait enzim.Monoklonal antibodi yang mengenali anti-IgE telah pra-dilapisi di sumur dari microplate, dan sampel serum/plasma manusia dan antibodi monoklonal lain yang diberi label enzim ditambahkan ke pori-pori piring.Nilai OD dibaca dan isinya dihitung oleh pembaca microplate.

Prosedur Uji

1.Semua reagen harus dibiarkan mencapai suhu kamar selama 15 menit sebelum digunakan.

2. encerkan penyangga cuci dengan kecepatan 1: 40 dengan air suling sebelum digunakan.

3Sampel harus sesuai dengan jumlah micro plate, setiap plate harus dilengkapi dengan sumur referensi (Jumlah sumur ditentukan oleh referensi dan sampel yang akan diuji).

Catatan: Gunakan ujung pipet pembuangan yang terpisah untuk setiap sampel, setiap referensi untuk menghindari kontaminasi silang.

4.Tambahkan 100μL sampel pengencer ke sumur yang sesuai, tambahkan 20μL masing-masing referensi S0, S1, S2, S3, S4, S5 dan sampel ke sumur yang sesuai.

5- Goyanglah dengan lembut untuk dicampur.

6. Pada akhir inkubasi, lepaskan dan buang tutup piring. Keluarkan, tambahkan penyangga cuci ke setiap sumur selama 10 detik. Ulangi 5 kali. Setelah siklus cuci terakhir,putar piring ke atas kertas atau handuk bersih, dan ketuk untuk menghapus sisa.

7. masing-masing menambahkan Konjugat 100μL. Inkubasi pada 37°C selama 30 menit dengan membran pelat penyegelan menyegel pelat.

8Cuci piring seperti langkah 6.

9. Tambahkan substrat A (50μL) dan substrat B (50μL). Goyangkan dengan lembut untuk mencampur. Inkubasi pada 37°C selama 10 menit dengan membran pelat penyegelan menyegel pelat.

10Tambahkan 50μL Stop Solution ke setiap sumur. Campurkan dengan lembut dengan mengguncang, baca penyerapan dalam waktu 10 menit setelah menghentikan reaksi.Kemudian baca nilai penyerapan pada 450nm/ 630nm dengan pembaca mikroplat.Menghitung konsentrasi dan mengevaluasi hasilnya.