Kit Tes TNF-α Elisa Manusia

Penggunaan yang dimaksudkan

Kit ini digunakan untuk menentukan konsentrasi TNF-α pada supernatal kultur sel manusia.

Prosedur penilaian

1- Peradangan dan tambahkan sampel: Peradangan kepadatan asli Standar seperti di bawah tabel: 400ng/L 5 Standard 150μl Original density Standard+150μl Standard diluent 200ng/L 4 Standard 150μl 5 Standard+150μl Standard diluent 100ng/L 3 Standard 150μl 4 Standard+150μl Standard diluent 50ng/L 2 Standard 150μl 3 Standard +150μl Standard diluent 25ng/L 1 Standard 150μl 2 Standard +150μl Standard diluent

2. tambahkan sampel:Set sampel kosong secara terpisah (sumber perbandingan kosong tidak menambahkan sampel dan HRP-Conjugate reagen, lain setiap langkah operasi adalah sama).Tambahkan 50μl standar ke Microelisa stripplateTambahkan sampel 40μl ke sampel uji, kemudian tambahkan sampel uji 10μl (pengecilan sampel akhir adalah 5 kali lipat), tambahkan sampel ke sampel, jangan menyentuh dinding sejauh mungkin, dan aduk dengan lembut.

3.Inkubasi: Setelah menutup lempeng dengan membran lempeng penutupan, inkubasi selama 30 menit pada 37°C.

4.Konfigurasi cairan: larutan cuci 30 (atau 20) kali lipat diencerkan 30 (atau 20) kali lipat dengan air distilasi dan cadangan.

5. mencuci: Buka membran pelat penutupan, buang Cairan, kering dengan ayunan, tambahkan pencuci buffer ke setiap sumur, tetap selama 30 detik kemudian mengalirkan, ulangi 5 kali, kering dengan menendang.

6.tambahkan enzim:Tambahkan reagen HRP-Conjugate 50μl ke setiap sel, kecuali sel kosong.

7. menginkubasi: Operasi dengan 3.

8.mencuci: Operasi dengan 5.

9.warna:Tambahkan Chromogen Solution A 50ul dan Chromogen Solution B 50ul ke masing-masing, hindari pengawetan cahaya selama 10 menit pada 37°C

10. Hentikan reaksi:Tambahkan Stop Solution50μl ke setiap wel, Hentikan reaksi ((warna biru berubah menjadi warna kuning).

11. tes: mengambil kosong dengan nilai nol, membaca penyerapan pada 450nm setelah menambahkan stop larutan dan dalam waktu 15 menit.

Persyaratan sampel

1. ekstrak secepat mungkin setelah sampel dikumpulkan, dan sesuai dengan literatur yang relevan, dan harus dilakukan percobaan secepat mungkin setelah ekstraksi.1 spesimen dapat disimpan pada suhu 20 °C untuk melestarikanHindari siklus pembekuan dan pencairan berulang.

2Tidak dapat mendeteksi sampel yang mengandung NaN3, karena NaN3 menghambat HRP aktif.

Catatan penting

1. kit mengambil dari lingkungan pendingin harus seimbang 15-30 menit pada suhu kamar, pelat ELISA dilapisi jika tidak habis setelah dibuka,Plat harus disimpan dalam kantong tertutup.

2. pencucian buffer akan kristalisasi pemisahan, itu dapat dipanaskan air membantu larut ketika diencerkan. mencuci tidak mempengaruhi hasil.

3. tambahkan Sampel dengan sampler Setiap langkah, Dan mengoreksi akurasi sering, menghindari kesalahan eksperimen. tambahkan sampel dalam waktu 5 menit, jika jumlah sampel banyak, merekomendasikan untuk menggunakan Voley.

4. jika kandungan bahan pengujian terlalu tinggi (OD sampel lebih besar dari ukuran standar pertama), silakan encerkan Sampel (n kali lipat), silahkan encerkan dan kalikan dengan faktor pengencer.(×n×5).

5Membran pelat penutupan hanya membatasi penggunaan sekali pakai, untuk menghindari kontaminasi silang.

6Substrat menghindari pengawetan cahaya.

7. Silakan sesuai dengan instruksi penggunaan ketat, Penentuan hasil tes harus mengambil microtiter pembaca plat sebagai standar.

8. Semua sampel, pencucian buffer dan setiap jenis buang harus sesuai dengan proses bahan infeksi.

9Jangan mencampur reagen dengan reagen dari lot lain.