Sandwich 8-OHdG ELISA Kit Mouse 8-Hydroxydeoxyguanosine Test Kit

Mouse 8-Hydroxy-desoxyguanosine; Kit ELISA 8-OHdG

• Kit ELISA Mouse 8-Hydroxy-desoxyguanosine (8-OHdG) kami adalah untuk menguji kadar 8-OHdG dalam serum Mouse, plasma, media kultur, atau cairan biologis apa pun.

Prinsip

  Kit ELISA ini menggunakan Sandwich-ELISA sebagai metodenya.Stripplate Microelisa yang disediakan dalam kit ini telah dilapisi sebelumnya dengan antibodi khusus untuk 8-OHdG.Standar atau sampel ditambahkan ke sumur stripplate Microelisa yang sesuai dan digabungkan ke antibodi spesifik.Kemudian antibodi terkonjugasi Horseradish Peroxidase (HRP) spesifik untuk 8-OHdG ditambahkan ke masing-masing stripplate Microelisa dan diinkubasi.Komponen gratis tersapu.Larutan substrat TMB ditambahkan ke setiap sumur.Hanya sumur yang mengandung antibodi 8-OHdG terkonjugasi 8-OHdG dan HRP yang akan tampak berwarna biru dan kemudian berubah menjadi kuning setelah penambahan stop solution.Densitas optik (OD) diukur secara spektrofotometri pada panjang gelombang 450 nm.Nilai OD sebanding dengan konsentrasi 8-OHdG.Anda dapat menghitung konsentrasi 8-OHdG dalam sampel dengan membandingkan OD sampel dengan kurva standar.

Bahan disediakan dengan kit

• Pengenceran Standar

Sepuluh sumur ditetapkan untuk standar dalam pelat strip Microelisa.Di Sumur 1 dan Sumur 2, 100μl Larutan standar dan 50l buffer Pengenceran Standar ditambahkan dan dicampur dengan baik.Di Sumur 3 dan Sumur 4, masing-masing 100μl larutan dari Sumur 1 dan Sumur 2 ditambahkan.Kemudian ditambahkan 50μl Standard Dilution buffer dan diaduk rata.50μl larutan dibuang dari Sumur 3 dan Sumur 4. Di Sumur 5 dan Sumur 6, masing-masing 50μl larutan dari Sumur 3 dan Sumur 4 ditambahkan.Kemudian ditambahkan 50μl Standard Dilution buffer dan diaduk rata.Di Sumur 7 dan Sumur 8, masing-masing 50μl larutan dari Sumur 5 dan Sumur 6 ditambahkan.Kemudian ditambahkan 50μl Standard Dilution buffer dan diaduk rata.Di Sumur 9 dan Sumur 10, masing-masing 50μl larutan dari Sumur 7 dan Sumur 8 ditambahkan.Kemudian ditambahkan 50μl Standard Dilution buffer dan diaduk rata.50μl larutan dibuang dari Sumur 9 dan Sumur 10. Setelah pengenceran, total volume di semua sumur adalah 50μl dan konsentrasinya adalah 900 pg/ml,600 pg/ml,300 pg/ml, 150 pg/ml dan 75pg/ml , masing-masing.

Perhitungan Hasil

Konsentrasi Mouse 8-OHdG Standard yang diketahui dan OD pembacaannya yang sesuai diplot pada skala log (sumbu x) dan skala log (sumbu y).Konsentrasi Mouse 8-OHdG dalam sampel ditentukan dengan memplot OD sampel pada sumbu Y.Konsentrasi asli dihitung dengan mengalikan faktor pengenceran.

presisi

Intra-assay Precision (Precision in a assay): 3 sampel dengan Mouse 8-OHdG tingkat rendah, menengah dan tinggi diuji masing-masing 20 kali pada satu piring.

Inter-assay Precision (Precision between assays): 3 sampel dengan Mouse 8-OHdG level rendah, menengah dan tinggi diuji pada 3 pelat berbeda, 8 ulangan di setiap pelat.

CV(%) = SD/rata-rataX100

Intra-Assay: CV<10%

Inter-Assay: CV<12%

Rentang pengujian

15 pg/ml- 1000 pg/ml

Kepekaan:

4.5pg/ml