Subunit Reseptor Interleukin-2 Alpha Mouse IL2R CD25 IL2-RA ELISA Kit

Subunit alfa reseptor Interleukin-2 tikus;IL2R;CD25; IL2-RA ELISA kit

Bahan disediakan dengan kit

Persyaratan spesimen

• serum-koagulasi pada suhu kamar 10-20 menit,sentrifugasi 20-menit pada kecepatan 2000-3000 rpm menghilangkan supernatan, Jika presipitasi muncul, Sentrifugal lagi.
• plasma-gunakan EDTA atau plasma sitrat yang sesuai sebagai antikoagulan, campur 10-20 menit,sentrifugasi 20 menit dengan kecepatan 2000-3000 rpm menghilangkan supernatan, Jika muncul presipitasi, Sentrifugal lagi.
• Air seni-kumpulkan sue wadah steril, sentrifugasi 20 menit dengan kecepatan 2000-3000 rpm menghilangkan supernatan, Jika muncul presipitasi, Sentrifugal lagi.Operasi Hidrotoraks dan cairan serebrospinal Referensi untuk itu.
• supernatan kultur sel-mendeteksi komponen sekretorik, mengumpulkan sue wadah steril, sentrifugasi 20 menit pada kecepatan 2000-3000 rpm menghilangkan supernatan, mendeteksi komposisi sel, Encerkan suspensi sel dengan PBS (PH7.2-7.4), Konsentrasi sel mencapai 1 juta / ml, siklus beku-cair berulang, kerusakan sel dan pelepasan komponen intraseluler, sentrifugasi 20 menit dengan kecepatan 2000-3000 rpm menghilangkan supernatan, Jika presipitasi muncul, Sentrifugal lagi.
• sampel jaringan- Setelah memotong sampel, periksa beratnya, tambahkan PBS (PH7.2-7.4), Beku dengan cepat dengan nitrogen cair, pertahankan sampel pada 2-8 setelah meleleh, tambahkan PBS (PH7.4), Dihomogenkan dengan tangan atau Penggiling, sentrifugasi 20 menit pada kecepatan 2000-3000 rpm menghilangkan supernatan.
• ekstrak sesegera mungkin setelah pengumpulan Spesimen, dan menurut literatur yang relevan, dan harus dilakukan percobaan sesegera mungkin setelah ekstraksi.Jika tidak bisa, spesimen dapat disimpan dalam -20 untuk diawetkan, Hindari siklus beku-cair berulang.
• Tidak dapat mendeteksi sampel yang mengandung NaN3, karena NaN3 menghambat HRP aktif.

Prinsip

Kit ELISA ini menggunakan Sandwich-ELISA sebagai metodenya.Stripplate Microelisa yang disediakan dalam kit ini telah dilapisi sebelumnya dengan antibodi spesifik untukIL2R.Standar atau sampel ditambahkan ke sumur stripplate Microelisa yang sesuai dan digabungkan ke antibodi spesifik.Kemudian Horseradish Peroxidase (HRP) - antibodi terkonjugasi spesifik untukIL2Rditambahkan ke masing-masing stripplate Microelisa dan diinkubasi.Komponen gratis tersapu.Larutan substrat TMB ditambahkan ke setiap sumur.Hanya sumur yang mengandungIL2Rdan antibodi trombomodulin terkonjugasi HRP akan tampak berwarna biru dan kemudian berubah menjadi kuning setelah penambahan stop solution.Densitas optik (OD) diukur secara spektrofotometri pada panjang gelombang 450 nm.Nilai OD sebanding dengan konsentrasiIL2R.Anda dapat menghitung konsentrasiIL2Rdalam sampel dengan membandingkan OD sampel dengan kurva standar.

Catatan:

• Simpan kit pada suhu 4°C setelah diterima. Kit harus diseimbangkan dengan suhu kamar sebelum pengujian.Lepaskan strip yang tidak diperlukan dari pelat IL2R Antibodi-Coated, segel kembali dalam foil zip-lock dan simpan pada suhu 4°C.
• Endapan mungkin muncul dalam buffer pencuci pekat.Harap panaskan buffer untuk melarutkan semua endapan, yang tidak akan mempengaruhi hasil.
• Pipet yang akurat harus digunakan untuk menghindari kesalahan eksperimental.Sampel harus ditambahkan ke Microplate dalam waktu kurang dari 5 menit.Jika sampel dalam jumlah besar disertakan, disarankan menggunakan pipet multisaluran.
• Kurva standar harus disertakan dalam setiap pengujian.Sumur tiruan direkomendasikan.Jika nilai OD sampel lebih besar dari sumur standar pertama, harap encerkan sampel (n kali) sebelum pengujian.Saat menghitung konsentrasi trombomodulin asli, kalikan faktor pengenceran total (XnX5).
• Untuk menghindari kontaminasi silang, sealer Microplate hanya untuk sekali pakai.
• Harap jauhkan Substrat dari cahaya.
• Semua operasi harus sesuai dengan instruksi pabrik secara ketat.Hasil ditentukan dengan Microtiter Plate Reader.
• Semua sampel, buffer pencuci dan limbah harus diperlakukan sebagai agen infeksius.
• Reagen dari lot yang berbeda tidak boleh dicampur.