Sandwich Elisa VD3 RUO Test Kit Vitamin D3 Elisa Kit Untuk Penggunaan Penelitian

Vitamin D3 Manusia; Kit ELISA VD3

• Tanggal kedaluwarsa: enam bulan.
• Penyimpanan: 2-8℃.
• Kit ELISA Vitamin D3 (VD3) Manusia kami adalah untuk menguji kadar Vitamin D3 (VD3) dalam serum manusia, plasma, media kultur atau cairan biologis apa pun.

Prinsip

  Kit ELISA ini menggunakan Sandwich-ELISA sebagai metodenya.Stripplate Microelisa yang disediakan dalam kit ini telah dilapisi sebelumnya dengan antibodi khusus untuk Vitamin D3 (VD3) .Standar atau sampel ditambahkan ke sumur stripplate Microelisa yang sesuai dan digabungkan ke antibodi spesifik.Kemudian Horseradish Peroxidase (HRP)- antibodi terkonjugasi spesifik untuk Vitamin D3 (VD3) ditambahkan ke masing-masing stripplate Microelisa dan diinkubasi.Komponen gratis tersapu.Larutan substrat TMB ditambahkan ke setiap sumur.Hanya sumur yang mengandung antibodi Vitamin D3 (VD3) dan HRP terkonjugasi Vitamin D3 (VD3) yang akan tampak berwarna biru dan kemudian berubah menjadi kuning setelah penambahan stop solution.Densitas optik (OD) diukur secara spektrofotometri pada panjang gelombang 450 nm.Nilai OD sebanding dengan konsentrasi Vitamin D3 (VD3).Anda dapat menghitung konsentrasi Vitamin D3 (VD3) dalam sampel dengan membandingkan OD sampel dengan kurva standar.

Bahan disediakan dengan kit

• Pengenceran Standar

Sepuluh sumur ditetapkan untuk standar dalam pelat strip Microelisa.Di Sumur 1 dan Sumur 2, 100μl Larutan standar dan 50l buffer Pengenceran Standar ditambahkan dan dicampur dengan baik.Di Sumur 3 dan Sumur 4, masing-masing 100μl larutan dari Sumur 1 dan Sumur 2 ditambahkan.Kemudian ditambahkan 50μl Standard Dilution buffer dan diaduk rata.50μl larutan dibuang dari Sumur 3 dan Sumur 4. Di Sumur 5 dan Sumur 6, masing-masing 50μl larutan dari Sumur 3 dan Sumur 4 ditambahkan.Kemudian ditambahkan 50μl Standard Dilution buffer dan diaduk rata.Di Sumur 7 dan Sumur 8, masing-masing 50μl larutan dari Sumur 5 dan Sumur 6 ditambahkan.Kemudian ditambahkan 50μl Standard Dilution buffer dan diaduk rata.Di Sumur 9 dan Sumur 10, masing-masing 50μl larutan dari Sumur 7 dan Sumur 8 ditambahkan.Kemudian ditambahkan 50μl Standard Dilution buffer dan diaduk rata.50μl larutan dibuang dari Sumur 9 dan Sumur 10. Setelah pengenceran, total volume di semua sumur adalah 50μl dan konsentrasinya adalah 30 ng/ml, 20 ng/ml, 10 ng/ml, 5 ng/ml dan 2,5 ng/ ml, masing-masing.

Perhitungan Hasil

Konsentrasi Human Vitamin D3 (VD3) Standar yang diketahui dan pembacaan OD yang sesuai diplot pada skala log (sumbu x) dan skala log (sumbu y).Konsentrasi Human Vitamin D3 (VD3) dalam sampel ditentukan dengan memplot OD sampel pada sumbu Y.Konsentrasi asli dihitung dengan mengalikan faktor pengenceran.

presisi

Intra-assay Precision (Precision in a assay): 3 sampel dengan Vitamin D3 (VD3) tingkat rendah, menengah dan tinggi diuji masing-masing 20 kali pada satu piring.

Inter-assay Precision (Precision between assays): 3 sampel dengan Vitamin D3 (VD3) tingkat rendah, menengah dan tinggi diuji pada 3 pelat berbeda, 8 ulangan di setiap pelat.

CV(%) = SD/rata-rataX100

Intra-Assay: CV<10%

Inter-Assay: CV<12%

Rentang pengujian

0,8 ng/ml -36 ng/ml

Kepekaan:

0,3 ng/ml

• Simpan kit pada suhu 4°C setelah diterima. Kit harus diseimbangkan dengan suhu kamar sebelum pengujian.Lepaskan strip yang tidak dibutuhkan dari pelat Human Vitamin D3 (VD3) Antibodi Dilapisi, segel kembali dalam foil zip-lock dan simpan pada suhu 4°C.
• Kurva standar harus disertakan dalam setiap pengujian.Sumur tiruan direkomendasikan.Jika nilai OD sampel lebih besar dari sumur standar pertama, harap encerkan sampel (n kali) sebelum pengujian.Saat menghitung konsentrasi Vitamin D3 (VD3) asli, harap kalikan faktor pengenceran total (XnX5).