RUO HBsAg Elisa kit

Tes immunosorbent yang terikat enzim untuk deteksi HBsAgdalam serum atau plasma

HBsAg EIA adalah imunoassay sandwich simultan fase padat, yang menggunakan antibodi monoklonal dan antibodi poliklonal yang spesifik untuk HBsAg.Microtiter juga dilapisi dengan antibodi monoklonal yang spesifik untuk HBsAgSebuah sampel serum ditambahkan ke sumur Microtiter yang dilapisi dengan antibodi bersama dengan antibodi poliklonal yang dikonjugasi enzim.Piring kemudian dicuci untuk menghilangkan bahan yang tidak terikatAkhirnya, larutan substrat ditambahkan ke sumur dan diinkubasi. warna biru akan berkembang sebanding dengan jumlah HBsAg yang ada dalam sampel. The enzyme-substrate reaction can be stopped and the result is visualized by naked eye or read by EIA plate reader for absorbance at the wavelength of 450 nm(450 nm/630 nm) and is proportional to the amount of antibodies present in the specimen..

Bahan yang disediakan bersama kit:

Prosedur Ujian:

Hal ini sangat disarankan untuk menganalisis setiap sampel dan kontrol dalam duplikat. semua reagen harus seimbang ke suhu kamar sebelum digunakan.

1. Menyalurkan satu tetes (50μl) Kontrol Positif serta Kontrol Negatif dalam duplikat ke sumur masing-masing.dan 50ul sampel serum atau plasma ke dalam sumur uji masing-masing.
2. Tambahkan satu tetes (50μl) Enzyme Conjugate ke setiap sumur. campurkan dengan lembut dengan memutar piring microtiter di bangku datar selama 1 menit.Jangan tambahkan Enzyme Conjugate ke sumur kosong.
3. Letakkan piring microtiter ke dalam kotak yang dibasahi, dan incubate pada 37°C selama 30 menit.
4. Cuci setiap sumur 5 kali dengan mengisi masing-masing sumur dengan buffer cuci yang diencerkan, kemudian membalikkan piring dengan kuat untuk mengeluarkan semua air dan memblokir tepi sumur pada kertas penyerap selama beberapa detik.
5. Tambahkan satu tetes (50μl) larutan substrat A (HRP-substrat) ke setiap sumur, kemudian tambahkan satu tetes (50μl) larutan substrat B (TMB) ke setiap sumur.
6. Tambahkan 1 tetes (50μl) Stop Solution ke setiap sumur untuk menghentikan reaksi warna. Baca nilai OD pada 450 nm/630 nm dengan pembaca piring filter ganda.Opsional untuk membaca nilai OD pada 450 nm dengan pembaca pelat filter tunggal. (menggunakan nilai OD dari sumur kosong untuk memperbaiki semua pembacaan OD dari semua sumur)