Murine Ifn Gamma RUO Test Kit Mouse Interferon Gamma Sandwich Method

Mouse Interferon ;Interferon gamma;IFN-γ;IFN-gamma;IFNG;ELISA Kit

Untuk penentuan in vitro kuantitatif konsentrasi Interferon (IFN-γ) dalam serum Tikus, plasma, media kultur atau cairan biologis apa pun.

Prinsip

Kit ELISA ini menggunakan Sandwich-ELISA sebagai metodenya.Stripplate Microelisa yang disediakan dalam kit ini telah dilapisi sebelumnya dengan antibodi khusus untuk IFN-γ.Standar atau sampel ditambahkan ke sumur stripplate Microelisa yang sesuai dan digabungkan ke antibodi spesifik.Kemudian antibodi terkonjugasi Horseradish Peroxidase (HRP)- spesifik untuk IFN-γ ditambahkan ke masing-masing stripplate Microelisa dan diinkubasi.Komponen gratis tersapu.Larutan substrat TMB ditambahkan ke setiap sumur.Hanya sumur yang mengandung antibodi IFN-γ terkonjugasi IFN-γ dan HRP yang akan tampak berwarna biru dan kemudian berubah menjadi kuning setelah penambahan stop solution.Densitas optik (OD) diukur secara spektrofotometri pada panjang gelombang 450 nm.Nilai OD sebanding dengan konsentrasi IFN-γ.Anda dapat menghitung konsentrasi IFN-γ dalam sampel dengan membandingkan OD sampel dengan kurva standar.

Bahan disediakan dengan kit

• Pengenceran Standar

Sepuluh sumur ditetapkan untuk standar dalam pelat strip Microelisa.Di Sumur 1 dan Sumur 2, 100μl Larutan standar dan 50l buffer Pengenceran Standar ditambahkan dan dicampur dengan baik.Di Sumur 3 dan Sumur 4, masing-masing 100μl larutan dari Sumur 1 dan Sumur 2 ditambahkan.Kemudian ditambahkan 50μl Standard Dilution buffer dan diaduk rata.50μl larutan dibuang dari Sumur 3 dan Sumur 4. Di Sumur 5 dan Sumur 6, masing-masing 50μl larutan dari Sumur 3 dan Sumur 4 ditambahkan.Kemudian ditambahkan 50μl Standard Dilution buffer dan diaduk rata.Di Sumur 7 dan Sumur 8, masing-masing 50μl larutan dari Sumur 5 dan Sumur 6 ditambahkan.Kemudian ditambahkan 50μl Standard Dilution buffer dan diaduk rata.Di Sumur 9 dan Sumur 10, masing-masing 50μl larutan dari Sumur 7 dan Sumur 8 ditambahkan.Kemudian ditambahkan 50μl Standard Dilution buffer dan diaduk rata.50μl larutan dibuang dari Sumur 9 dan Sumur 10. Setelah pengenceran, total volume di semua sumur adalah 50μl dan konsentrasinya adalah 180 pg/ml, 120pg/ml, 60 pg/ml, 30pg/ml dan 15 pg/ml, masing-masing.

Perhitungan Hasil

Konsentrasi yang diketahui dari Standar IFN-γ Mouse dan OD pembacaannya yang sesuai diplot pada skala log (sumbu x) dan skala log (sumbu y).Konsentrasi Mouse IFN-γ dalam sampel ditentukan dengan memplot OD sampel pada sumbu Y.Konsentrasi asli dihitung dengan mengalikan faktor pengenceran.

presisi

Intra-assay Precision (Precision in a assay): 3 sampel dengan Mouse IFN-γ level rendah, menengah dan tinggi diuji masing-masing 20 kali pada satu piring.

Inter-assay Precision (Precision between assays): 3 sampel dengan IFN-γ Mouse tingkat rendah, menengah dan tinggi diuji pada 3 pelat berbeda, 8 ulangan di setiap pelat.

CV(%) = SD/rata-rataX100

Intra-Assay: CV<10%

Inter-Assay: CV<12%

Rentang pengujian

3pg/ml-200 pg/ml

Kepekaan:

0.8pg/ml