Human Thrombomodulin TM Fetomodulin CD141 THBD THRM ELISA Kit

Trombomodulin manusia, TM, Fetomodulin, CD141, THBD, THRM ELISA Kit Untuk Penggunaan Penelitian

Trombomodulin manusia, TM, Fetomodulin, CD141, THBD, THRM ELISA Kit

Bahan disediakan dengan kit

Prinsip

Kit ELISA ini menggunakan Sandwich-ELISA sebagai metodenya.Stripplate Microelisa yang disediakan dalam kit ini telah dilapisi sebelumnya dengan antibodi khusus untuk trombomodulin .Standar atau sampel ditambahkan ke sumur stripplate Microelisa yang sesuai dan digabungkan ke antibodi spesifik.Kemudian sebuah antibodi terkonjugasi Horseradish Peroxidase (HRP) khusus untuk trombomodulin ditambahkan ke masing-masing stripplate Microelisa dan diinkubasi.Komponen gratis tersapu.Larutan substrat TMB ditambahkan ke setiap sumur.Hanya sumur yang mengandung trombomodulin dan antibodi trombomodulin terkonjugasi HRP yang akan tampak berwarna biru dan kemudian berubah menjadi kuning setelah penambahan larutan penghenti.Densitas optik (OD) diukur secara spektrofotometri pada panjang gelombang 450 nm.Nilai OD sebanding dengan konsentrasi trombomodulin.Anda dapat menghitung konsentrasi trombomodulin dalam sampel dengan membandingkan OD sampel dengan kurva standar.

Persiapan sampel

1.Persiapan serum

Setelah pengambilan seluruh darah, biarkan darah menggumpal dengan membiarkannya tidak terganggu pada suhu kamar.Ini biasanya memakan waktu 10-20 menit.Keluarkan bekuan dengan sentrifugasi pada 2.000-3.000 rpm selama 20 menit.Jika endapan muncul selama reservasi, sampel harus disentrifugasi lagi.

2.Persiapan plasma

Kumpulkan seluruh darah ke dalam tabung dengan antikoagulan (EDTA atau sitrat).Setelah diinkubasi pada suhu kamar selama 10-20 menit, tabung disentrifugasi selama 20 menit dengan kecepatan 2.000-3.000 rpm.Kumpulkan supernatan dengan hati-hati sebagai sampel plasma.Jika endapan muncul selama reservasi, sampel harus disentrifugasi lagi.

3.Sampel urin

Kumpulkan urin ke dalam tabung aseptik.Kumpulkan supernatan dengan hati-hati setelah disentrifugasi selama 20 menit pada 2.000-3.000 rpm.Jika endapan muncul selama reservasi, sampel harus disentrifugasi lagi.Prosedur preparasi cairan serebrospinal dan cairan pleuroperitoneal sama dengan sampel urin.

4.Sampel sel

Jika Anda ingin mendeteksi sekresi sel, kumpulkan supernatan kultur ke dalam tabung aseptik.Kumpulkan supernatan dengan hati-hati setelah disentrifugasi selama 20 menit pada 2.000-3.000 rpm.Jika Anda ingin mendeteksi komponen intraseluler, encerkan sel menjadi 1X10⁶/ml dengan PBS (pH 7,2-7,4).Sel-sel dihancurkan untuk melepaskan komponen intraseluler dengan pembekuan dan pencairan berulang.Kumpulkan supernatan dengan hati-hati setelah disentrifugasi selama 20 menit pada 2.000-3.000 rpm.Jika endapan muncul selama reservasi, sampel harus disentrifugasi lagi.

5.sampel jaringan

Sampel jaringan dipotong, ditimbang, dibekukan dalam nitrogen cair dan disimpan pada suhu -80℃ untuk penggunaan selanjutnya.Sampel jaringan dihomogenisasi setelah ditambahkan PBS (pH 7,4).Sampel harus dioperasikan pada 4℃.Kumpulkan supernatan dengan hati-hati setelah disentrifugasi selama 20 menit pada 2.000-3.000 rpm.Aliquot supernatan untuk uji ELISA dan penggunaan di masa mendatang.

Catatan:

• Ekstraksi sampel dan uji ELISA harus dilakukan sesegera mungkin setelah pengambilan sampel.Sampel harus diekstraksi sesuai dengan literatur yang relevan.Jika uji ELISA tidak dapat dilakukan segera, sampel dapat disimpan pada suhu -20℃. Siklus beku-cair berulang harus dihindari.
• Kit kami tidak dapat digunakan untuk sampel dengan NaN3 yang dapat menghambat aktivitas HRP.