ISO Thyroxine T4 Elisa Test Tes Serum T4 Gratis 110 Menit Waktu Baca

T4 Tiroksin
REF: DS177703 96 tes

1. Tujuan penggunaan
Immunoassay untuk penentuan kuantitatif in vitro tiroksin dalam serum manusia.

2. Ringkasan
Hormon tiroksin (T4) adalah produk utama yang disekresikan oleh kelenjar tiroid dan merupakan komponen integral dari sistem pengatur hipotalamus-hipofisis-tiroid.Ini memiliki fungsi anabolik mempengaruhi metabolisme.Tiroksin terbentuk dalam reaksi kopling dari dua molekul DIT (3,5-diiodotyrosine) di kelenjar tiroid.Ini disimpan terikat tiroglobulin di lumina folikel tiroid dan disekresikan sesuai kebutuhan di bawah pengaruh TSH.(1, 2) Sebagian besar (> 99 %) dari total tiroksin (T4) dalam serum terdapat dalam bentuk terikat protein.Karena konsentrasi protein transpor dalam serum dipengaruhi oleh efek eksogen dan endogen, status protein pengikat juga harus diperhitungkan dalam penilaian konsentrasi hormon tiroid dalam serum.Jika hal ini diabaikan, perubahan pada protein pengikat (misalnya karena preparat yang mengandung estrogen, selama kehamilan atau dengan adanya sindrom nefrotik, dll.) dapat menyebabkan penilaian yang salah dari status metabolisme tiroid.(3, 4, 5, 6, 7) Penentuan T4 dapat digunakan untuk indikasi berikut: deteksi hipertiroidisme, deteksi hipotiroidisme primer dan sekunder, dan pemantauan terapi supresi TSH.(8)
Uji T4 menggunakan prinsip uji kompetitif dengan antibodi yang secara khusus ditujukan terhadap T4.T4 endogen, dilepaskan oleh aksi asam sulfonat 8-anilino-1-naftalena (ANS).

3. Bahan Reagen disediakan
• Microplate Dilapisi, 8 x 12 strip, 96 sumur, pra-dilapisi dengan turunan T4.
• Kalibrator, 6 vial, masing-masing 1 ml, siap pakai;Konsentrasi: 0(A), 2.5(B), 5(C), 10(D), 15(E) dan 30(F) g/dL.
• Enzyme Conjugate, 1 vial, 6,0 ml HRP (horseradish peroxidase) berlabel monoklonal T4 tikus dalam buffer Tris-NaCl yang mengandung BSA (bovine serum albumin).Mengandung pengawet ProClin300 0,2%.ANS 1,5 mg/mL.
• Substrat, 1 vial, 11ml, siap pakai, (tetramethylbenzidine) TMB.
• Stop Solution, 1 vial, 6,0 ml 1 mol/l asam sulfat.
• Konsentrat Larutan Cuci, 1 vial, 25 ml (konsentrat 40X), larutan pencuci PBS-Tween.
• IFU, 1 salinan.
• Tutup Piring : 1 buah.

4. Bahan yang dibutuhkan (tetapi tidak disediakan)
• Pembaca pelat mikro dengan kemampuan penyerap panjang gelombang 450nm dan 620nm.
• Mesin cuci piring mikro.
• Inkubator.
• Pengocok piring.
• Mikropipet dan mikropipet multisaluran menghasilkan 50μl dengan presisi lebih baik dari 1,5%.
• Kertas penyerap.
• Air sulingan

Prosedur pengetesan

Pastikan sampel pasien, kalibrator, dan kontrol berada pada suhu sekitar (18-25 ) sebelum pengukuran.Campur semua reagen melalui pembalik lembut sebelum digunakan.

• Gunakan hanya jumlah sumur yang diperlukan dan format sumur pelat mikro untuk setiap kalibrator dan sampel yang akan diuji.• Tambahkan 50 L kalibrator atau sampel ke setiap sumur.

• Tambahkan 50 L enzim konjugat ke masing-masing sumur.

• Kocok pelat mikro perlahan selama 30 detik agar tercampur.

• Tutup piring dengan tutup piring dan inkubasi pada suhu 37 selama 60 menit.

• Buang isi piring mikro dengan dekantasi atau aspirasi.Jika menuang, ketuk dan keringkan pelat dengan kertas penyerap.

• Tambahkan 350 l larutan pencuci, tuang (ketuk dan blot) atau aspirasi.Ulangi 4 kali tambahan untuk total 5 kali pencucian.Mesin cuci strip microplate otomatis dapat digunakan.Di akhir pencucian, balikkan piring dan tepuk sisa larutan pencuci ke kertas penyerap.

• Tambahkan 100 L substrat ke setiap sumur.

• Tutup dan inkubasi pada suhu kamar (18-25℃) dalam gelap untuk reaksi selama 20 menit.Jangan goyangkan pelat setelah penambahan substrat.• Tambahkan 50 L stop solution ke setiap sumur.

• Kocok selama 15-20 detik untuk mencampur cairan di dalam sumur.Penting untuk memastikan bahwa warna biru berubah menjadi kuning sepenuhnya.

• Baca absorbansi masing-masing sumur pada 450 nm ( menggunakan 620 hingga 630 nm sebagai panjang gelombang referensi untuk meminimalkan ketidaksempurnaan sumur) dalam pembaca pelat mikro.Hasilnya harus dibaca dalam waktu 30 menit setelah menambahkan stop solution