Tes Thyrotropin TSH ELISA Tes Hormon Perangsang Tiroid

Penjualan Panas TSH ELISA TEST KIT
REF: DS177701 96 tes

Penggunaan yang dimaksudkan
Immunoassay untuk penentuan kuantitatif in vitro tirotropin dalam serum manusia.

1. Ringkasan

• Hormon perangsang tiroid (TSH, tirotropin) adalah glikoprotein yang memiliki berat molekul sekitar.30000 dalton dan terdiri dari dua subunit.
• Pengukuran konsentrasi serum seringkali tirotropin (TSH), suatu glikoprotein dengan berat molekul 28.000 dalton dan disekresikan dari hipofisis anterior, umumnya dianggap sebagai indikator paling sensitif yang tersedia untuk diagnosis hipotiroidisme primer dan sekunder (hipofisis). 2).
• Pengukuran TSH sama-sama berguna dalam membedakan hipotiroidisme sekunder dan tersier (hipotalamus) dari penyakit tiroid primer.Pelepasan TSH dari hipofisis diatur oleh faktor pelepas tirotropin (TRH), yang disekresikan oleh hipotalamus, dan oleh aksi langsung T4 dan triiodotironin (T3), hormon tiroid, di hipofisis.
• Peningkatan kadar T3 dan T4 mengurangi respons hipofisis terhadap efek stimulasi TRH.Pada hipotiroidisme sekunder dan tersier, konsentrasi T4 biasanya rendah dan kadar TSH umumnya rendah atau normal.Baik defisiensi TSH hipofisis (hipotiroidisme sekunder) atau insufisiensi stimulasi hipofisis oleh TRH (hipotiroidisme tersier) menyebabkan hal ini.
• Tes stimulasi TRH membedakan kondisi ini.Pada hipotiroidisme sekunder, respon TSH terhadap TRH tumpul sementara respon normal atau tertunda diperoleh pada hipotiroidisme tersier. Selanjutnya, munculnya tes imunoenzimometri telah memberikan laboratorium dengan sensitivitas yang cukup untuk memungkinkan membedakan hipertiroidisme dari populasi eutiroid dan memperluas kegunaannya. pengukuran TSH.Metode ini adalah uji generasi kedua, yang menyediakan sarana untuk diskriminasi dalam kisaran hipertiroid-eutiroid.(3)

2. Bahan Reagen disediakan
• Microplate Dilapisi, 8 x 12 strip, 96 sumur, pra-dilapisi dengan Anti-TSH monoklonal mouse.
• Kalibrator, 6 vial, masing-masing 1 ml, siap pakai;Konsentrasi: 0(A), 0,5(B), 2(C), 5(D), 10(E) dan 25(F) IU/mL.
• Enzyme Conjugate, 1 vial, 6,0 ml HRP (horseradish peroxidase) berlabel tikus monoklonal Anti-TSH dalam buffer Tris-NaCl yang mengandung BSA (bovine serum albumin).Mengandung 0,1% ProClin300 pengawet.
• Substrat, 1 vial, 11ml, siap pakai, (tetramethylbenzidine) TMB.
• Stop Solution, 1 vial, 6,0 ml 1 mol/l asam sulfat.
• Konsentrat Larutan Cuci, 1 vial, 25 ml (konsentrat 40X), larutan pencuci PBS-Tween.
• IFU, 1 salinan.
• Tutup Piring : 1 buah.

Bahan yang dibutuhkan (tetapi tidak disediakan)
• Pembaca pelat mikro dengan kemampuan penyerap panjang gelombang 450nm dan 620nm.
• Mesin cuci piring mikro.
• Inkubator.
• Pengocok piring.
• Mikropipet dan mikropipet multisaluran menghasilkan 50μl dengan presisi lebih baik dari 1,5%.
• Kertas penyerap.
• Air sulingan

3. Prosedur pengujian

Pastikan sampel pasien, kalibrator, dan kontrol berada pada suhu sekitar (18-25 ) sebelum pengukuran.Campur semua reagen melalui pembalik lembut sebelum digunakan.

• Gunakan hanya jumlah sumur yang diperlukan dan format sumur pelat mikro untuk setiap kalibrator dan sampel yang akan diuji.• Tambahkan 25 L kalibrator atau sampel ke setiap sumur.

• Tambahkan 100 L enzim konjugat ke masing-masing sumur.

• Kocok pelat mikro perlahan selama 30 detik agar tercampur.

• Tutup piring dengan tutup piring dan inkubasi pada suhu 37℃ selama 60 menit.

• Buang isi piring mikro dengan dekantasi atau aspirasi.Jika menuang, ketuk dan keringkan pelat dengan kertas penyerap.

• Tambahkan 350 L larutan pencuci, tuang (ketuk dan blot) atau aspirasi.Ulangi 4 kali tambahan untuk total 5 kali pencucian.Mesin cuci strip microplate otomatis dapat digunakan.Di akhir pencucian, balikkan piring dan tepuk sisa larutan pencuci ke kertas penyerap.

• Tambahkan 100 L substrat ke setiap sumur.

• Tutup dan Inkubasi pada suhu sekitar (18-25℃) dalam gelap untuk reaksi selama 20 menit.Jangan goyangkan pelat setelah penambahan substrat.

• Tambahkan 50 L stop solution ke setiap sumur.

• Kocok selama 15-20 detik untuk mencampur cairan di dalam sumur.Penting untuk memastikan bahwa warna biru berubah menjadi kuning sepenuhnya.

• Baca absorbansi masing-masing sumur pada 450 nm ( menggunakan 620 hingga 630 nm sebagai panjang gelombang referensi untuk meminimalkan ketidaksempurnaan sumur) dalam pembaca pelat mikro.Hasilnya harus dibaca dalam waktu 30 menit setelah menambahkan stop solution