EBV-VCA IgA Ab Test ELISA Kit Enzyme Immunoassay Test Plasma Spesimen

EBV-VCA IgA Ab ELISA Kit No katalog: BE501A
Enzim immunoassay untuk mendeteksi antibodi IgA terhadap antigen kapsid virus (VCA) dari Epstein-Barr Virus (EBV).
 
1. PRINSIP PEMERIKSAAN
EBV-VCA IgA Ab ELISA Kit menggunakan sistem deteksi di mana sumur microplate dilapisi dengan antigen rekombinan yang sesuai dengan segmen EBV-VCA yang sangat antigenik.Spesimen serum atau plasma, kontrol ditambahkan ke sumur.Selama inkubasi, antibodi IgA spesifik untuk EBV-VCA yang ada dalam spesimen akan berikatan dengan antigen rekombinan yang difiksasi ke sumur lempeng mikro.Sumur dicuci untuk menghilangkan bahan yang tidak terikat, dan konjugat IgA peroksidase anti-manusia akan berikatan dengan kompleks antigen-antibodi dan kelebihan konjugat enzim yang tidak terikat akan dibuang lagi dengan pencucian.Substrat enzim, tetramethylbenzidine (TMB), ditambahkan pada inkubasi substrat akan dihidrolisis oleh enzim terikat dan warna biru atau biru-hijau berkembang di sumur yang mengandung antibodi IgA EBV-VCA.Reaksi enzim dihentikan dengan penambahan asam sulfat.Intensitas warna yang dikembangkan dibaca secara spektrofotometri pada 450 nm (450 nm/630 nm) dan sebanding dengan jumlah antibodi yang ada dalam spesimen.
REAGEN
 
2. Bahan yang disediakan bersama kit:

 
3. PROSEDUR PEMERIKSAAN

1. Bawa ELISA Kit (semua reagen), dan Spesimen ke suhu kamar sebelum digunakan (sekitar 30 menit).
2. Encerkan buffer pencuci pekat 1:19 dengan ddH2O.Misalnya, 5 ml konsentrat penyangga pencuci harus diencerkan hingga volume total 100 ml dengan air deionisasi atau air suling.
3. Untuk setiap pengujian, atur satu sumur kosong sebagai kontrol latar belakang, dua kontrol positif dan tiga kontrol negatif.Dispense 100ml kontrol positif dan kontrol negatif duplikat ke dalam sumur individu.Baik sampel maupun HRP-Conjugate tidak boleh ditambahkan ke dalam sumur Blank.
4. Dispense 100ml Sample Dilution ke dalam sumur uji individu kecuali kontrol.
5. Tambahkan 10ml setiap sampel uji ke dalam sumur uji;vortex untuk bercampur.
6. Inkubasi selama 30 menit pada suhu 37°C
7. Cuci setiap sumur 5 kali dengan mengisi setiap sumur dengan buffer pencuci yang diencerkan, lalu balikkan pelat dengan kuat untuk mengeluarkan semua air dan tutup tepi sumur di atas kertas penyerap selama beberapa detik.
8. Tambahkan 100ml Enzyme Conjugate ke masing-masing well.Aduk perlahan dengan cara memutar plat mikrotiter di atas flat bench selama 1 menit.Jangan menambahkan Enzim Konjugasi ke sumur kosong.
9. Inkubasi selama 20 menit pada suhu 37°C
10. Cuci piring 5 kali seperti langkah 7.
11. Tambahkan satu tetes (50ml) Larutan Substrat A (HRP-substrat) ke setiap sumur, lalu tambahkan satu tetes (50ml) Larutan Substrat B (TMB) ke setiap sumur.Aduk perlahan dan inkubasi pada suhu 37°C selama 30 menit..
12. Tambahkan satu tetes (50ml) Stop Solution ke setiap sumur untuk menghentikan reaksi warna.Baca nilai OD pada 450 nm/630 nm dengan pembaca pelat filter ganda.Ini adalah pilihan untuk membaca nilai OD pada 450 nm dengan pembaca pelat filter tunggal.(menggunakan nilai OD dari sumur kosong untuk mengoreksi semua pembacaan OD dari semua sumur)