Plasma IgM 96pcs Elisa Test Kit HAV Diagnos Antibody Test Kit

HAV IgM Elisa Kit 96 Tes/Kit

Catolog No.: BE301A

1. PRINSIP

1. Kit ini menggunakan metode capture ELISA untuk mendeteksi IgM anti-HAV.Antibodi IgM (μchain) anti-manusia tikus yang dimurnikan dilapisi pada fase padat multi-sumur.
2. Sebuah HAV-Ag konjugat ditambahkan ke sumur dilapisi setelah sampel encer ditambahkan dan diinkubasi.Kemudian lobak peroksidase berlabel HAV-Ag ditambahkan.Jika HAV-IgM hadir dalam sampel, kompleks Anti-μ-rantai-HAV-IgM –HAV-Ag-berlabel dengan HRP akan terbentuk.
3. Cuci sumur untuk menghilangkan komponen serum lain yang tidak terikat, inkubasi dengan substrat (TMB) untuk membentuk produk berwarna, dan ukur absorbansi pada 450nm untuk menunjukkan ada tidaknya HAV-IgM dalam sampel.
4. Tes ini khusus, sensitif, dapat direproduksi dan mudah dioperasikan.

2. BAHAN YANG DISEDIAKAN

1. Pelat Microwell Dilapisi Anti-μ-rantai 1 blok (96sumur)
2. Enzyme Conjugant (HAVAg-HRP) 1 botol (6ml)
3. Konjugasi HAV-Ag 1 botol (6ml)
4. Serum Kontrol Negatif 1 botol (1ml)
5. Serum Kontrol Positif 1 botol (1ml)
6. 20 X Wash Buffer (diencerkan sebelum digunakan) 1 botol (30ml)
7. Substrat A 1 botol (6ml)
8. Substrat B 1 botol (6ml)
9. Stop Solution(2M H2SO4) 1 botol (6ml)
10. Kantong Plastik 1 kantong
11. Kertas Segel 3 buah
12. Manual 1 masing-masing

3. Prosedur Tes

1. Bawa Kit ELISA untuk IgM Antibodi ke Virus Hepatitis A (semua reagen), dan sampel ke suhu kamar sebelum digunakan (kurang lebih 30 menit).

2. Encerkan buffer pencuci pekat 1:19 dengan ddH2O.

3. Encerkan sampel (1:1000) dengan garam fisiologis.

4. Untuk setiap tes, buat satu blanko, dua kontrol positif dan tiga kontrol negatif.Tambahkan 100μl serum kontrol positif dan negatif masing-masing ke dalam sumur kontrol positif dan negatif.

5. Tambahkan 100μl sampel encer ke dalam sumur uji lainnya.

6. Tutup sumur dengan kertas segel, kemudian inkubasi selama 30 menit pada suhu 37°C.

7. Buang cairan di semua sumur dan isi sumur dengan larutan pencuci.Diamkan selama 15 detik, buang cairan di semua sumur dan isi sumur dengan larutan pencuci.Ulangi 5 kali dan keringkan sumur setelah pencucian terakhir.

8. Tambahkan 50 l konjugat HAV-Ag di setiap sumur kecuali blanko.

9. Tambahkanμl 50 l Enzyme Conjugant di setiap well kecuali blanko

10.Tutup sumur dengan kertas segel, kemudian inkubasi selama 30 menit pada suhu 37°C.

11. Ulangi langkah 7.

12.Tambahkan 50 l substrat A dan B masing-masing ke masing-masing sumur, aduk perlahan terlindung dari cahaya dan inkubasi 15 menit pada 37°C.

13. Tambahkan 50μl stop solution ke dalam setiap sumur untuk menghentikan reaksi, termasuk sumur kosong.

14. Ukur absorbansi pada 450 nm terhadap blanko, atau ukur absorbansi pada 450 nm/630-690 nm.