Rat Tumor Necrosis Factor Alpha Elisa Kit Untuk Tnf Alpha 48 Wells

Faktor Nekrosis Tumor Tikus ,Cachectin,TNF,TNFSF2,TNF-α ELISA KIT

Bahan disediakan dengan kit

Prinsip

Kit ELISA ini menggunakan Sandwich-ELISA sebagai metodenya.Stripplate Microelisa yang disediakan dalam kit ini telah dilapisi sebelumnya dengan antibodi spesifik untukTNF-α.Standar atau sampel ditambahkan ke sumur stripplate Microelisa yang sesuai dan digabungkan ke antibodi spesifik.Kemudian Horseradish Peroxidase (HRP) - antibodi terkonjugasi spesifik untukTNF-αditambahkan ke masing-masing stripplate Microelisa dan diinkubasi.Komponen gratis tersapu.Larutan substrat TMB ditambahkan ke setiap sumur.Hanya sumur yang mengandungTNF-αdan antibodi trombomodulin terkonjugasi HRP akan tampak berwarna biru dan kemudian berubah menjadi kuning setelah penambahan stop solution.Densitas optik (OD) diukur secara spektrofotometri pada panjang gelombang 450 nm.Nilai OD sebanding dengan konsentrasiTNF-α.Anda dapat menghitung konsentrasiTNF-αdalam sampel dengan membandingkan OD sampel dengan kurva standar.

Catatan:

• Simpan kit pada suhu 4°C setelah diterima. Kit harus diseimbangkan dengan suhu kamar sebelum pengujian.Lepaskan strip yang tidak diperlukan dari pelat TNF-α Antibodi Dilapisi, segel kembali dalam foil zip-lock dan simpan pada suhu 4°C.
• Endapan mungkin muncul dalam buffer pencuci pekat.Harap panaskan buffer untuk melarutkan semua endapan, yang tidak akan mempengaruhi hasil.
• Pipet yang akurat harus digunakan untuk menghindari kesalahan eksperimental.Sampel harus ditambahkan ke Microplate dalam waktu kurang dari 5 menit.Jika sampel dalam jumlah besar disertakan, disarankan menggunakan pipet multisaluran.
• Kurva standar harus disertakan dalam setiap pengujian.Sumur tiruan direkomendasikan.Jika nilai OD sampel lebih besar dari sumur standar pertama, harap encerkan sampel (n kali) sebelum pengujian.Saat menghitung konsentrasi trombomodulin asli, kalikan faktor pengenceran total (XnX5).
• Untuk menghindari kontaminasi silang, sealer Microplate hanya untuk sekali pakai.
• Harap jauhkan Substrat dari cahaya.
• Semua operasi harus sesuai dengan instruksi pabrik secara ketat.Hasil ditentukan dengan Microtiter Plate Reader.
• Semua sampel, buffer pencuci dan limbah harus diperlakukan sebagai agen infeksius.
• Reagen dari lot yang berbeda tidak boleh dicampur.

Konsentrasi yang diketahui dari Standar TNF-a dan OD pembacaannya yang sesuai diplot pada skala log (sumbu x) dan skala log (sumbu y) masing-masing.Konsentrasi TNF-a dalam sampel ditentukan dengan memplot OD sampel pada sumbu Y.Konsentrasi asli dihitung dengan mengalikan faktor pengenceran.